电镜低剂量技术的仪器改装

　　应用高分辨电镜技术研究生物大分子结构的主要障碍是未染色的样品对辐射损伤的高度敏感性。le/的电子剂量，就会损伤样品。低剂量技术是防止辐射损伤的主要方法。低剂量技术要求电镜应能探测极低剂量的束流(如<0.01e/)，并能进行轴外聚焦。目前多数商品电镜达不到要求，因而需要改装。我们对JEM--100CX/fl电镜进行了三处改装:

　　1，改装电子束流检测系统。用改装原电镜曝光表线路的办法，将束流表的量程向小的方向扩展100倍，以实现低剂量的测定。在ExposureMeterPB线路中的IC1后串人运算放大器F007B，(图1示)，当测量低剂量时，K合上，F007B串人电路，放大电路增益提高，检测灵敏度改善，选配合适的反馈电阻，当使用4万倍档时，(此为研究生物大分子通常使用的倍数，)束流表对物面上的最小检测量从原的1.5e/变为0.015e/，这就基本满足了低剂量技术的检测要求。上述数据是使用EM-sFH法拉弟杆来测定并校正的。当电镜要在正常情况下使用，只需将K断开，束流表恢复指示原来读数。

　　2，增设轴外聚焦园屏。由于在低剂量下工作，图像很暗，无法聚焦，同探用离轴高剂量聚焦的办法，即在被记录像以外(离轴)的地方，装上一个小荧光屏，聚焦时，将光斑移至小屏上，提高剂量，用双目镜聚焦，从而避免被记录部分的样品遭受电子束损伤.(图2)。小荧光屏安装在原电镜的电子衍射中央挡板操作杆上，操作杆加装两个定位装置，使得小屏能准确地停留在两个合适的位置上，一是通常情况下，停在不影响拍摄方屏活动的地方，二是低剂量聚焦时停在靠近观察窗口且双目镜易于调节、对准的地方。

　　3，改装底片数据记录的曝光量装置。电镜底电数据记录曝光量是根据一般灵敏度底片的感光速度而选定的，低剂量拍片时，用高灵敏度底片，如KodakS-630，film此时若不降低曝光量，底片数据模糊不清，我们探用降低数码管电压的办法，用开关将电阻串入数码管电路，使数码管亮度适量降低，从而达到在高灵敏度底片能获得清晰数码显示的目的，当使用一般灵敏度底片时，只要用开关将电阻切除，数码管电路便恢复正常。

　　实践证明，电镜经上述改装后，同时能适应正常观察和低剂量观察的需要，性能稳定，操作方便。

　　作者：卢忻英 汤长风 张景强(中山大学昆虫研究所)