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Leica CM3050S冰冻切片机的使用和维护

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  组织切片技术是医学和生命科学领域中的重要技术,主要有石蜡切片、震动切片和冰冻切片等技术。其中冰冻切片技术的应用越来越广泛,其优点就是快速、便捷,且能较完整的保存抗原活性,如细胞的某些抗原成分,特别细胞膜抗原,受体抗原,酶及肽类抗原在石蜡切片的处理过程中,不可避免的受到破坏或失去抗原活性,而且对于原位分子杂交等核酸探针杂交实验,冰冻切片技术也成为首选切片技术。冰冻切片机的应用也相应的越来越广泛,本文以LeicaCM3050S为例,探讨了如何更好的使用和维护冰冻切片机,为科研和临床更好的服务。

  Leica CM3050S具有电动和手动切片功能,可实现3种自动切片模式,速度可调,厚度范围0.5-300μm;还具有自动修块功能,厚度范围:5-150μm;冷冻室温度范围0℃至-40℃,具有独立的样本制冷系统,样本头制冷温度-10℃至-50℃。

  1 仪器操作

  1.1 仪器的操作系统主要由总开关、操纵面板1、操纵面板2、手轮和冷冻箱组成。总开关控制仪器的供电,仪器开机运行后,无特殊原因不要关闭总开关,若由于断电或其他原因关闭总电源后,则必须要对冷冻箱及其附件进行除菌和干燥处理后才能重新启动仪器。

  1.2 操纵面板1主要控制冷冻箱照明、温度、除霜、时间设定等功能,并显示切片厚度、切片模式等信息。

  温度调节包括箱体温度(CT)和样品头温度(OT),OT温度设定可比CT略高。不同的组织选用不同的温度进行切片,过高或过低的温度均会影响切片的质量,表1中是一些常用组织的参考切片温度,具体采用的温度还需操作者在实践中进行摸索。除霜是冰冻切片机每天均需进行的操作,用于除去仪器运行过程中,箱体内部产生的霜。LeicaCM3050S具有三种除霜模式:箱体自动除霜、箱体手动除霜和样品头手动除霜模式。箱体自动除霜每24小时自动进行一次,具体时间可以人为设定(最好设定在00:00左右),除霜结束后仪器自动降温到设定值。自动除霜时程的默认设置是8分钟,如果仪器长时间使用后,除霜8分钟无法使箱体完全解冻,可以通过增加除霜时程来解决。箱体手动除霜和样品头手动除霜模式可以通过选择手动除霜键来进行(一般不使用)。

  1.3 操纵面板2主要控制电动切片、样品头升降、切片厚度和修片厚度。电动切片有三种模式:间歇模式、连续模式和单次模式。电动切片速度可以手动调节,电动切片的开启和中断可以手控或者通过脚踏板控制。样品头升降主要用来调节样品和刀片之间的距离,具有粗调和细调两种模式。

  1.4 仪器使用后的操作。日常使用后需进行一些处理:将OT设为0℃,CT设为-10℃,这样既可以延长压缩机的寿命又利于除霜过程的进行;取出刀片并进行除菌、干燥以备下次使用;清除箱体中的切片废弃物;取出未使用的组织样本另行保存;锁定手轮和控制面板1。长时间不使用仪器可以将总开关关闭,但箱体和所有有关切片的附件均需进行除菌和干燥处理。

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