凯氏定氮仪原理和校准的方法

　　0引言

　　凯氏定氮仪被广泛运用于食品、谷物、油料等中粗蛋白质的测定，其测量结果的准确度和可靠性直接影响到对上述产品的质量评价。近来，客户针对此类仪器的校准需求越来越多，而目前国内尚无针对凯氏定氮仪的检定规程或校准规范，这给此类仪器的计量校准带来了相当难度。通过研究仪器的原理和用户的实际使用要求，参考国内外相关标准，提出一种该仪器的校准方法。

　　1凯氏定氮仪的原理及测定方法

　　凯氏定氮仪是根据凯氏定氮法设计的用于测定化合物或混合物中总氮量的一种仪器。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品，将有机氮都转变成无机钱盐，然后碱化蒸馏使氨游离，随水蒸气馏出并为硼酸吸收，再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量计算出样品中的含氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮含量乘以换算系数计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

　　1.1消化

　　图1给出了常用凯氏定氮的消化和蒸馏装置。

　　将样品与浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾小}" f昆合加人烧瓶中，确保样品的完全浸润。将烧瓶置于预热到420℃的消化单元，消化至消化液呈透明澄清的蓝绿色后，继续加热0.51mh，使样品中的有机氮完全转化为无机氮一硫酸钱。

　　1.2蒸馏

　　将消化液取下放冷，小心加人50 mL水。量取50 mL硼酸到接受瓶中，加人混合指示剂。连接好蒸馏装置，向消解烧瓶中加人5 mL过量的氢氧化钠溶液完全中和所使用的硫酸，开始蒸馏。使消化液中的钱根转化为氨后馏出，为过量的硼酸吸收。

　　1.3滴定和计算

　　用硫酸或盐酸标准溶液滴定吸收液至终点，式(1)计算氮含量及蛋白质含量。

　　然后根据试样的不同种类，将氮含量乘以相应的氮换算成蛋白质的系数，即可得到蛋白质含量。

　　2凯氏定氮仪的校准项目和方法

　　2.1空白试验

　　空白试验可以检查仪器的稳定程度并排除杂质氮的干扰。蔗糖是纯碳氢化合物，本身不含有氮化物，且比较稳定，不会随着温度、水、电解质等的变化发生改变。故蔗糖可以用来模拟有机氮中碳、氢元素组分，使空白测定的消化过程在与试样消化相近的条件下进行，保证空白值的正确性。空白试验方法:称取约0.59蔗糖(无氮)代替试样，按测定步骤进行空白测定，连续测量两次，消耗标准滴定溶液的平均体积不得超过0.2 mLo

　　2.2回收率

　　通过回收率的测定可以直接反应凯氏定氮仪测量结果的准确性。利用钱盐含氮量稳定且不用消化的特点，可以简单快速地测定回收率。