全自动微生物分析仪检测细菌耐药表型性能评价

    药物敏感性测定对于临床治疗具有重要意义^［１］。手工药物敏感试验操作繁琐，耗时长（１８～２４ｈ），如需确定细菌耐药表型则耗时更多，且人为判断结果易造成误差。随着多药耐药菌株的临床分离率日益升高，准确、快速的药敏测定已十分必要。自动化微生物鉴定／药敏分析仪能满足这一要求^{[１－５］}。 ＶＩＴＥＫ　２Ｃｏｍｐａｃｔ是法国生物梅里埃公司ＶＩＴＥＫ系列全自动微生物鉴定／药敏分析仪的最新机型，可对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌 （ＭＲＳＡ）、超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）和红霉素诱导克林霉素耐药进行快速检测。为评价其对临床常见细菌耐药表型的检测能力，笔者进行了以下对比 试验。

    １　材料与方法

    １．１　菌株　本院微生物实验室２００４～２００８年分离自临床标本，并经ＰＣＲ检测证实携带耐药基因的菌株，其中携带ｍｅｃＡ基因ＭＲＳＡ　３０株，携 带ｅｒｍ基因、红霉素诱导克林霉素耐药（Ｄ－试验阳性）金黄色葡萄球菌３１株［其中甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（ＭＳＳＡ）２３株］，ＥＳＢＬｓ表型确证 阳性、携带ＴＥＭ或ＣＴＸ－Ｍ型基因大肠埃希菌３０株^{［６－７］}。质控株为大肠埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２、金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ２９２１３。所有质控菌株最低抑菌浓度（ＭＩＣ）测定结果均在ＶＩＴＥＫ　２Ｃｏｍｐａｃｔ质控允许范围内。

    １．２　方法　根据ＶＩＴＥＫ　２Ｃｏｍｐａｃｔ药敏卡说明书的要求进行菌种培养、菌悬液制备和药敏测定。头孢西丁筛选、Ｄ－试验、ＥＳＢＬｓ检测采用美 国临床和实验室标准化协会（ＣＬＳＩ）２００４年推荐的Ｋ－Ｂ纸片法为参考方法，并经ＰＣＲ检测确定携带相应耐药基因^{［６－７］}。

    ２　结　　果

    ２．１　ＥＳＢＬｓ测定　３０株产ＥＳＢＬｓ菌株经ＶＩＴＥＫ　２Ｃｏｍｐａｃｔ高级专家系统（ＡＥＳ）检测显示耐药表型（ＣＴＸ－Ｍ　ＬＩＫＥ或 ＥＸ－ＴＥＮＤＥＤ　ＳＰＥＣＴＲＵＭ　ＢＥＴＡ－ＬＡＣＴＡＭＡＳＥ）阳性，与ＣＬＳＩＥＳＢＬｓ纸片确证法及ＣＲ检测结果比较，其ＥＳＢＬｓ检测灵敏 度和特异度均为１００％。结果见表１。

    ２．２　ＭＲＳＡ筛选　３０株ＭＲＳＡ经ＶＩＴＥＫ　２Ｃｏｍｐａｃｔ　ＡＥＳ检测显示耐药表型均为ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮＯＦ　ＰＢＰ－ｍｅｃＡ，头 孢西丁筛选阳性（２３株ＭＳＳＡ均为头孢西丁筛选阴性），与ＣＬＳＩ头孢西丁纸片确证法及ＰＣＲ检测结果比较，其ＭＲＳＡ检测灵敏度和特异度均为 １００％。结果见表１。