电泳技术研究进展及应用
在电场作用下,带电颗粒向其对应的电极方向以一定的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带称为电泳(electrophoresis),在小离子的情况下,称为离子导电性现象。这是一种不完全的电解现象,所需的产物不是直接释放在电极上,而是使它们不同的运动同步受阻在两个电极间的中间位置上。这个现象,是1807年Reuss在研究胶体颗粒时发现的,它能分离非常类似的物质,包括不同的蛋白质,提高了分析和制备的效果。1937年Tiselius提出了自由界面电泳技术,并使他获得诺贝尔奖。1950年以来在纸上和在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶上区带电泳的应用,1960年以后,圆盘和顶替电泳(等速电泳)以及等电点聚焦又提供了许多提高分辨率的方法[1] 。
在任何电泳设备中,都有三个意义明确的部件,阴极、阳极和实现带电粒子分离的电泳室。根据在电泳室中使用的电解质系统,可以把电泳作如下分类:①自由界面电泳②自由溶液中的区带电泳③在不同支持物上的区带电泳④在有机溶剂中的凝胶电泳⑤亲和电泳⑥等速电泳⑦等点聚焦⑧免疫电泳。也可按照不用支持体和用支持体来区别电泳技术,分为自由电泳(无支持体)及区带电泳(有支持体)两大类[ 2 ] 。或者根据它的操作方法,分为二维电泳、交叉电泳、连续或者不连续电泳、电泳-层析相结合技术等。
1 电泳技术研究进展
在电泳技术中,毛细管电泳、双向电泳和凝胶电泳三种技术应用取得了重大研究进展,是目前比较成熟的技术,在科学界受到了高度的重视,称得上是目前应用最广泛、重要性最强的电泳技术
毛细管电泳是上世纪 80 年代后期分析化学,特别是生物分析化学的重大研究进展,也是90年代最有影响的分离手段之一[3] 。CE 仪器和各种检测器的联用是对传统电泳技术的重大突破。毛细管电泳系统进入商品化应用已有十几年的历史,在仪器的硬件、软件、方法、分离凝胶介质和试剂的标准化等方面有着长足的进步。随着商品化仪器的出现,CE技术快速渗透到与分析化学相关的各个领域。目前我国科学家已经参与包括芯片实验室等工作在内的分析化学最前沿研究,在毛细管电泳理论探索及应用研究开展的系统的创造性工作,正使我国在这一领域的研究进人世界前沿水平[4] 。
在蛋白质组学研究中,双向电泳是最常用的技术,具有简便、快速、高分辨率和重复性等优点。1975年,意大利生化学家O’Farrell发明了双向电泳技术,大大提高了蛋白质分离的分辨率而得以广泛应用,至今已经历了整整三十年的发展,双向电泳技术已较为成 熟
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