紫外一可见分光光度计为光谱测量开辟了更好的途径
工作在紫外一可见区的仪器正在为当今世界上的生物科学、化学研究、分析实验室、环境检测以及聚合物、染料等分析作出重要贡献。老产品的更新设计 和新系列的开发,使紫外一可见分光光度计在简化操作、增强数据采集和处理能力以及在拓宽分析对象和应用范围方面均取得了令人瞩日的进展。
近代光谱分析的范围包括从X射线光谱到红外光谱的宽广范围,利用的波长大致从10-10一104米。测量紫外可见光谱通常在190一 380n,n的紫外区和380一800nm的可见区。这个区域的明显特点之一是被测试样吸收的光基本上与被分析物质的浓度成线性(即符合贝尔定律)。在常 规应用中,投射在试样上的电磁辐射,一部分被吸收,一部分透过。透过部分是试样厚度(光路长度)和存在共中的吸光物质(原子和分子)浓度的函数,这种简单 的线性关系和相当容易测量的紫外可见光,使紫外可见光谱测量技术成为许许多多定量分析方法的基础。
在早期的紫外可见仪器中和许多日前正在生产的仪器中,光首先通过单色器产生要求波长的单色光,然后再测量其通过样品后的吸收率。虽然紫外-可见 技术的理论基础30年来没有大的变化,但二极管阵列分光光度计的开发却代表了一种值得注意的变化。在这种仪器中,白光首先通过样品,然后才进行波长分离, 这与单色器在前、样品在后的通常光路恰好相反,因此人们称这种系统为“反向光路”。1979年,Hewlett一Paekard公司(简称HP公司)推出 了世界上第一台商品二极管阵列分光光度计(HP845OA)。它既具有独特的光学系统,还开创了用微处理器集中控制仪器和数据采集的新概念。与通常顺序扫 描式分光光度计相比,二极管阵列仪器无需移动部件就可同时采集所有波长的光谱数据。对用户来说,最明显的优点是提高了分析速度。同时还提高了精度和重现 性,尤其是用于多组份分析。但当在光谱_L作定点吸收测量时,应用正向光路仪器更为合适。为满足用户对不同功能仪器的需求,许多生产厂家提供了适合各种应 用的,范围广泛的系列化仪器。
一、基本型仪器
在基本型系统中,HP公司提供的标准型HP8452A紫外一可见分光光度计,可在紫外一可见区完成一般用途的测量。与大多数紫外—可见分光光度 计不同,它只用一个氖灯来覆盖这一光谱区,由干光学系统的高效率,足以为高灵敏度测量提供足够的光强。8452A能在0.6秒时间内扫描整个光谱,或者说 镶0.1秒可侧量多达20个波长的数据,这使用户可以很容易在一个或几个波长仁跟踪瞬间消失的反应物,而在另些波长卜观察反应产物的形成。
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